您好, 歡迎來到環(huán)保在線! 登錄| 免費注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
18918128223
當(dāng)前位置:上海宸功生物技術(shù)有限公司>>技術(shù)文章>>乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒
HL70017.6 v.A
乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑盒產(chǎn)品說明書
主要用途
乙酰膽堿酯酶活性抑制劑篩選比色法檢測試劑是一種旨在通過乙酰膽堿酯酶反應(yīng)系統(tǒng)中,在抑制劑存在與否的情況下,所釋放出巰基膽堿,與Ellman試劑反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物,出現(xiàn)吸光峰值的變化,即采用比色法來評價樣品酶活抑制能力的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種抑制劑篩選檢測。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。
技術(shù)背景
乙酰膽堿酯酶(Acetylcholinesterase;AchE;EC3.1.1.7),又稱為紅細(xì)胞膽堿酯酶(RBC cholinesterase),廣泛存在于真核生物,包括某些植物,尤其在腦組織、神經(jīng)肌肉連接處(neuromuscular junction)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的膽堿能突觸(cholinergic synapses)和紅細(xì)胞膜上高度表達(dá),催化主要的神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的水解反應(yīng),產(chǎn)生乙酸和膽堿,終止突觸傳導(dǎo)。其功能在于調(diào)節(jié)乙酰膽堿作用。例如有機(jī)磷紗林(Sarin),抑制乙酰膽堿酯酶活性,導(dǎo)致神經(jīng)肌肉癱瘓,zui終發(fā)生窒息(asphyxiation)。血清乙酰膽堿酯酶濃度顯著降低與有機(jī)磷殺蟲劑中毒有關(guān),因此血液檢測是環(huán)境污染的重要指標(biāo)。基于人工合成底物碘化硫代乙酰膽堿(acetylthiocholine iodide),在抑制劑存在與否的情況下,通過乙酰膽堿酯酶的作用,水解產(chǎn)生乙酸和硫代膽堿(thiocholine),與Ellman試劑5,5-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)[5,5’-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化(412nm波長),來定量分析乙酰膽堿酯酶抑制劑的效應(yīng)。乙酰膽堿酯酶反應(yīng)系統(tǒng)為:
產(chǎn)品內(nèi)容
緩沖液(Reagent A) 毫升
反應(yīng)液(Reagent B) 毫升
底物液(Reagent C) 毫升
陰性液(Reagent D) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在-20℃冰箱里;反應(yīng)液(Reagent B)和底物液(Reagent C)避免光照;有效保證6月
用戶自備
乙酰膽堿酯酶:用于抑制劑篩選
1.5毫升離心管:用于樣品操作的容器
比色皿或酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀或酶標(biāo)儀:用于比色分析
實驗步驟
內(nèi)容物 | 空背景對照 | 樣本背景 | *酶活性 | 待測抑制劑酶活性 |
緩沖液(Reagent A) | xx微升 | xx微升 | xx微升 | xx微升 |
陰性液(Reagent D) | xx微升 | xx微升 | xx微升 | —— |
待測抑制劑 | —— | xx微升 | ―― | xx微升 |
用戶自備的純化酶 | —— | —— | xx微升(1毫單位) | xx微升(1毫單位) |
96孔板每孔總量 | 空背景對照孔 (xx微升) | 樣本背景孔 (xx微升) | *活性孔 (xx微升) | 待測抑制劑樣品孔 (xx微升) |
輕輕搖動酶標(biāo)板,混勻,放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里孵育30分鐘。然后進(jìn)行下列操作 |
注意事項
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),環(huán)保在線對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。