鏈霉菌屬細(xì)菌基因組DNA 純化試劑盒

產(chǎn)品說明書
主要用途
鏈霉菌屬細(xì)菌基因組DNA 純化試劑是一種旨在通過化學(xué)和生物酶方法裂解、去蛋白、去
RNA 以及鹽析沉淀來達(dá)到純化革蘭氏陽性細(xì)菌基因組DNA 的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該
技術(shù)由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種革蘭氏陽性細(xì)菌DNA 樣品
的制備，尤其適用于鏈霉菌種。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，操作方便，提取效率和純化程度
高。
技術(shù)背景
采用多種生物酶聯(lián)合使用，使帶有菌絲體和孢子的細(xì)菌更容易裂解，同時(shí)有效地使細(xì)菌中核
酶、PCR 反應(yīng)抑制劑失活，其DNA 提取效率和純度俱佳。
產(chǎn)品內(nèi)容
緩沖液（Reagent A） 毫升
酶解液I（Reagent B） 毫升
裂解液A（Reagent C） 毫升
裂解液B（Reagent D） 毫升
酶解液II（Reagent E） 微升
酶解液III（Reagent F） 微升
萃取液（Reagent G） 毫升
濃縮液（Reagent H） 毫升
沉淀液（Reagent I） 毫升
清理液（Reagent J） 毫升
保存液（Reagent K） 毫升
說明書1 份
保存方式
保存酶解液I（Reagent B），酶解液II（Reagent E），酶解液III（Reagent F）和萃取液（Reagent
G）在－20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；有效保證6 月
用戶自備
1.5 毫升離心管：用于樣品操作的容器
37℃和65℃恒溫水槽：用于樣品孵育
微型臺(tái)式離心機(jī)：用于沉淀細(xì)菌和核酸
渦旋震蕩儀：用于混勻反應(yīng)物
實(shí)驗(yàn)步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，開啟恒溫水槽，并設(shè)置溫度分別為℃和℃。然后開始下列操作：
1． 加入毫升新鮮菌液到毫升離心管
2． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
3． 小心抽去上清液
4． 加入毫升緩沖液（Reagent A）
5． 渦旋震蕩，充分混勻細(xì)菌顆粒群
6． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
7． 小心抽去上清液
8． 加入微升緩沖液（Reagent A）
9． 加入微升酶解液I（Reagent B）
10．渦旋震蕩，充分混勻細(xì)菌顆粒群
11．放進(jìn)℃恒溫水槽孵育小時(shí)
12．加入微升裂解液A（Reagent C）
13．加入微升裂解液B（Reagent D），充分混勻
14．放進(jìn)℃恒溫水槽孵育分鐘
15．置入冰槽分鐘
16．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
17．小心移取上清液到新的毫升離心管
18．加入微升酶解液II（Reagent E），充分混勻
19．放進(jìn)℃恒溫水槽孵育分鐘
20．加入微升酶解液III（Reagent F），充分混勻
21．放進(jìn)℃恒溫水槽孵育分鐘，其間每間隔分鐘，渦旋震蕩秒
22．置于室溫下冷卻
23．加入微升萃取液（Reagent G）
24．渦旋震蕩秒
25．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
26．移出上層液相溶液到新的毫升離心管
27．加入微升濃縮液（Reagent H）
28．加入微升沉淀液（Reagent I）
29．上下傾倒混勻
29．放進(jìn)℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
30．小心抽掉上清液
31．加入毫升清理液（Reagent J）
32．放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心分鐘，速度為g（或RPM 例如eppendorf5415D）
33．小心抽去上清液
34．空氣中晾干
35．加入微升保存液（Reagent K）
36．放進(jìn)℃冰箱里過夜備用或即刻進(jìn)行后續(xù)操作
注意事項(xiàng)
1． 本產(chǎn)品為20 次操作
2． 操作時(shí)，須戴手套
3． 本產(chǎn)品主要用于鏈霉菌屬的基因組DNA 純化
4． 本產(chǎn)品采用特殊酶解法，更為有效地提取基因組DNA
5． 建議使用足夠的起始細(xì)菌量
6． 每毫升細(xì)菌可以獲得3 至9 微克不等的基因組DNA
7． 本公司提供系列細(xì)菌技術(shù)產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定提取效率和純化程度高