細(xì)胞中性脂質(zhì)油紅O染色試劑盒

產(chǎn)品說明書

主要用途

細(xì)胞中性脂質(zhì)油紅O染色試劑是一種旨在使用高度脂溶性偶氮染料油性紅O染色技術(shù)，特異性地使細(xì)胞內(nèi)中性甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白顯示紅色，以分析細(xì)胞樣品中脂質(zhì)狀況的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實(shí)驗證明的。其適用于各種人體和動物細(xì)胞樣本。用于成脂細(xì)胞定性、細(xì)胞病理學(xué)分析（脂質(zhì)細(xì)胞瘤；LIPOID）和識別（脂肪肉瘤；liposarcoma）等研究。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，著色清晰。 

技術(shù)背景

脂類物質(zhì)（LIPIDS）是一類脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇類（STEROL）物質(zhì)，例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機(jī)體中具有能量儲存的作用，是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細(xì)胞信號分子。油性紅O（Oil Red O），又稱為27號紅色溶劑（Solvent Red 27）或蘇丹紅5B（Sudan Red 5B），是一種脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME AZO DYE）。其分子式為C26H24N4O，分子量為408.51。染色顯示細(xì)胞脂類物質(zhì)呈紅色。

產(chǎn)品內(nèi)容

清理液（Reagent A）  毫升

固著液（Reagent B）  毫升

脫水液（Reagent C）  毫升

染色液（Reagent D）  毫升

澄清液（Reagent E）  毫升

產(chǎn)品說明書       1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D），避免光照；有效保證6月

用戶自備

蘇木素復(fù)染試劑盒：用于常規(guī)染色后復(fù)染

經(jīng)典水相封片液：用于染色后封片處理

小型染色缸：用于細(xì)胞染色操作

溫箱：用于試劑預(yù)熱或保存

光學(xué)顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗步驟

實(shí)驗開始前，將染色液（Reagent D）置于60℃溫箱里預(yù)熱，避免光照。然后進(jìn)行下列操作。

操作一：細(xì)胞載玻片染色

• 樣本固著處理

• 取出待測的細(xì)胞載玻片  
• 小心加上xx微升清理液（Reagent A）在載玻片上，鋪滿整個樣品表面
• 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A）
• 小心加上xx微升固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面
• 室溫下，孵育10分鐘
• 小心移去載玻片上的固著液（Reagent B）
• 小心加上xx微升清理液（Reagent A），清洗樣品表面
• 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A）
• 重復(fù)實(shí)驗步驟7至8一次

二、樣本染色處理

• 小心加上xx微升脫水液（Reagent C）在載玻片上，鋪滿整個載玻片樣品表面
• 室溫下靜置5分鐘
• 小心移去載玻片上的脫水液（Reagent C）
• 重復(fù)實(shí)驗步驟1至3一次
• 小心加上xx微升染色液（Reagent D），鋪滿整個載玻片樣品表面
• 室溫下靜置7分鐘；或直至可見紅色
• 小心移去載玻片上的染色液（Reagent D） 
• 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 輕輕移去載玻片上的清理液（Reagent A） 

三、 樣本復(fù)染處理

• 小心加上xx微升澄清液（Reagent E）在載玻片上，鋪滿整個載玻片樣品表面
• 室溫下孵育3分鐘
• 小心移去載玻片上的澄清液（Reagent E）
• 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心移去載玻片上的清理液（Reagent A） 
• （選擇步驟）樣本復(fù)染處理（蘇木素）
• 放上蓋玻片或水相封片
• 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察

操作二：24孔細(xì)胞培養(yǎng)板染色

一、樣本固著處理

1．小心抽去24孔細(xì)胞培養(yǎng)板里的培養(yǎng)液

2．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗生長中的細(xì)胞表面

3．小心抽去每孔里的清理液（Reagent A）

4．每孔加入xx微升固著液（Reagent B），覆蓋整個生長表面

5．在室溫下孵育10分鐘

6．小心抽去固著液（Reagent B）

7．每孔加入xx微升清理液（Reagent A），清洗細(xì)胞表面

8．小心抽去清理液（Reagent A）

9．重復(fù)實(shí)驗步驟7和8二次

二、樣本染色處理

• 小心加上xx微升脫水液（Reagent C），覆蓋整個生長表面
• 室溫下靜置5分鐘
• 小心抽去脫水液（Reagent C）
• 重復(fù)實(shí)驗步驟1至3一次
• 小心加上xx微升染色液（Reagent D），覆蓋整個生長表面
• 室溫下靜置7分鐘；或直至可見紅色
• 小心抽去染色液（Reagent D）
• 室溫下，小心加入xx微升清理液（Reagent A）
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心抽去清理液（Reagent A）

三、 樣本復(fù)染處理

• 小心加上xx微升平衡液（Reagent E），覆蓋整個生長表面
• 室溫下孵育5分鐘
• 小心抽去平衡液（Reagent E）
• 小心加入xx微升清理液（Reagent A）
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心抽去清理液（Reagent A）
• 樣本復(fù)染處理（蘇木素）
• 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察

注意事項

• 本產(chǎn)品為20次（細(xì)胞載玻片）操作
• 操作時，須戴手套
• 所有操作在室溫下進(jìn)行
• 每次更換試劑溶液時，保持細(xì)胞表面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴，呈濕潤狀態(tài)，可見反光
• 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿細(xì)胞表面
• 樣品染色避免過度，肉眼可見紅色即可終止染色
• 建議使用蘇木素復(fù)染試劑盒，增加染色對比度
• 細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察 
• 封片處理，避免使用有機(jī)溶劑類包括乙醇等，而使用水相封片液；
• 本公司提供系列脂類染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
• 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰