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上海聯(lián)邁生物工程有限公司
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所 在 地上海市
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更新時間：2018-06-08 14:17:28瀏覽次數(shù)：220次
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柱式真菌RNAOUT本產(chǎn)品是在本公司真菌RNAOUT（CAT#:60305）基礎上改進的柱式產(chǎn)品，跟 真菌RNAOUT相比，它具有下列特點：
1. 柱式操作，更加簡單快捷，整個過程只需要約30分鐘。
柱式真菌RNAOUT
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
柱式真菌RNAOUT | 50次 | 1690元 |
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本產(chǎn)品是在本公司真菌RNAOUT（CAT#:60305）基礎上改進的柱式產(chǎn)品，跟 真菌RNAOUT相比，它具有下列特點：
1. 柱式操作，更加簡單快捷，整個過程只需要約30分鐘。
2. RNA純度高，OD260/280一般都在2.0左右，可直接用于RT-PCR、 Northern雜交、microarray hybridization、cDNA合成等。
3. RNA產(chǎn)量高，一般在20-70 μ g/mL酵母培養(yǎng)物（約2.0 ×107個細胞）
4. 非酶細胞破裂法，適用于各種形態(tài)的真菌和各個種屬的真菌，包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pombe 和 Pichia pastoris 等。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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