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ELISA實驗的原理和常見辦法

2021-8-11  閱讀(2966)


ELISA實驗是科研人員經(jīng)常用到的實驗方法。很多人覺得ELISA很簡單,其實不然?,F(xiàn)在我們一起了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。


實驗原理:

 1.包被:抗原/抗體,固相化
 2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標抗原/抗體
 3.洗滌:使結(jié)合在固相上的抗原抗體復合物與未結(jié)合的別離
 4.底物顯色:定性/定量剖析
 

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常用辦法:
 1. 間接法
 檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
 優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種挑選能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反響性。
 缺陷:交互反響發(fā)生的機率較高
 2. 雙抗體夾心法
 檢測大分子抗原常用的辦法。
 優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。
 缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
 3. 競爭法
 檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。
 優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
 缺陷:全體的敏感性和專一性都較差。



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