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上海博湖生物科技有限公司
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白介素elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)測定方法與注意事項(xiàng)
2021-8-18 閱讀(2673)
白介素elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)測定方法：
1、定性測定
(1)陽性判定值法(cut-off value，CO值)：一般為陰性對照的平均A值加一個(gè)常數(shù)，試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化，要先計(jì)算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽性。
(2)抑制率法：在競爭抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。
抑制率(％)＝(A陰性對照A- A待測)／陰性對照X100％,一般以抑制率≥50％為陽性
2、半定量測定
結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后，進(jìn)行ELISA檢測，在陽性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度"。
3、定量測定
即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，與待測標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行測定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以絕對量或活性單位表示。
二、注意事項(xiàng):
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最hao控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最hao做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴(yán)格按照小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3) ELISA試劑盒說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
