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制作標(biāo)準(zhǔn)曲線, 以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y軸,利用作圖軟件得出一個(gè)合適的計(jì)算方法。建議使用合適的軟件來(lái)作圖,比如CurveExpert 1.4。這款軟件能夠給出很多種方法(比如直線、半對(duì)數(shù)、對(duì)數(shù)、四參數(shù)方程等)并從中選擇一條最合適的方程。要想檢驗(yàn)?zāi)硹l曲線是否與表中數(shù)據(jù)吻合,可以將標(biāo)準(zhǔn)品的濃度作為未知數(shù),將對(duì)應(yīng)的OD值帶入該方程,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)品的濃度,得到的結(jié)果應(yīng)該與實(shí)際濃度很接近(+/-10%)。選擇擬合度的那條曲線。
以下是CurveExpert1.4的使用過(guò)程:
1. 將OD值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度數(shù)據(jù)復(fù)制粘貼到表格中
2. 生成和選擇標(biāo)準(zhǔn)曲線
3. 通過(guò)曲線計(jì)算樣品濃度
輸入OD值,點(diǎn)擊“計(jì)算"按鈕,得到樣品的準(zhǔn)確濃度。
或者得到相關(guān)方程,通過(guò)excel來(lái)計(jì)算濃度。
如果需要導(dǎo)出方程,可點(diǎn)擊“復(fù)制",粘貼至excel中。
4. 對(duì)于OD值落在標(biāo)準(zhǔn)曲線之外的情況
如果樣品的OD值超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線的值,在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)該先將樣品稀釋從而得到準(zhǔn)確的濃度。樣品的最終度應(yīng)該是計(jì)算出的濃度乘以稀釋倍數(shù)。
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