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西安百螢生物科技有限公司
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Portelite 熒光法DNA 定量試劑盒*產品資料

時間:2024/1/29閱讀:55
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產品簡介

產品中文名:Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒

產品英文名:Portelite™ Fluorimetric DNA Quantitation Kit

產品貨號:17665

產品規(guī)格:100 Tests 

產品概述

在進行各種分析的DNA樣品制備中,DNA定量是一項非常重要的任務。 Portelite 熒光DNA定量試劑盒提供了使用Qubit熒光儀操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它針對Cytocite 和Qubit 熒光儀進行了優(yōu)化。 Portelite 熒光DNA定量測定在三個數量級上呈線性。該測定法對RNA上的雙鏈DNA(dsDNA)具有高度選擇性,并針對測量10 pg / µL至10 ng / µL的dsDNA濃度進行了優(yōu)化。Helixyte Green-BR與dsDNA結合后表現出較大的熒光增強,并且比UV吸光度讀數高幾個數量級。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優(yōu)質的Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒。

適用儀器

量子位熒光計

 

Ex:

480 nm

Em:

530 nm 

規(guī)格:

0.2 mL PCR 小瓶

 

CytoCite 熒光計

 

Ex:

480 nm

Em:

530 nm

規(guī)格:

0.2 mL PCR小瓶

實驗方案

樣品實驗方案

簡要概述

1.準備Helixyte Green BR工作溶液

2.在每個0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液

3.在每個試管中添加10 uL DNA標準溶液或測試樣品

4.在室溫下孵育2分鐘

5.使用CytoCite 熒光儀或Qubit 檢測熒光

注意:打開之前,請將所有成分置于室溫下。

溶液配制

工作溶液配制

Helixyte Green-BR工作溶液:DNA分析緩沖液(組分B)中稀釋200倍Portelite dsDNA試劑(組分A)。 例如,要為8個樣品準備足夠的工作溶液,請將5uL Helixyte Green BR(組分A)添加到1mL DNA分析緩沖液(組分B)中。注意:通過用箔紙覆蓋或將其置于黑暗中來保護工作液免受光照。 我們建議在塑料容器中操作而不是玻璃中制備該溶液,因為染料可能會吸附到玻璃表面。 為了獲得佳結果,應在準備后的幾個小時內使用此溶液。

實驗步驟

根據DNA樣品的估計濃度,樣品量可以在1?20 uL的范圍內。推薦的樣品量為10 uL,DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內。如果使用其他樣品體積,請在濃度計算中調整稀釋倍數。

10 uL樣品體積(DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內)實驗方案。

1.在每個Cytocite 樣品管(#CCT100)或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意:請使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管,例如#CCT100。

2.向每個試管中加入10 µL DNA標準品或測試樣品,然后離心2?3秒進行混合。

3.將所有試管在室溫下孵育2分鐘。

4.將樣品插入CytoCite 或Quibit 中,并通過綠色熒光通道檢測熒光。若使用CytoCite,請遵循適用于CytoCite 熒光儀的程序。

標準校準曲線的準備

對于Portelite 分析,您可以選擇使用DNA標準液繪制校正曲線。

1.在DNA分析緩沖液(成分B)中,用100 ng/uL的DNA標準BR#2(成分D)進行1/3系列稀釋,得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA標準稀釋液。

2.在每個試管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。

3.將10 uL標準液或10 uL樣品添加到0.2 mL PCR管中。

4.將反應在室溫下孵育2分鐘。

5.將樣品插入CytoCite ,并通過綠色熒光通道檢測熒光。 

圖示

 1.使用具有寬動態(tài)范圍的Portelite 熒光DNA定量試劑盒生成的DNA標準曲線。 使用綠色熒光通道定量熒光強度,使用線性擬合計算回歸模型。 

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