Amplite 比色法葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的用于定量蛋白的試劑盒，葡萄糖氧化酶是二聚體蛋白質(zhì)，其催化β-D-葡萄糖氧化成過氧化氫和D-葡糖酸-1,5-內(nèi)酯，其被水解成葡糖酸。 它廣泛用于測(cè)定體液中的葡萄糖以及從飲料，食品和其他農(nóng)產(chǎn)品中去除殘留的葡萄糖和氧氣。 此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物傳感器中以檢測(cè)葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒為溶液中葡萄糖氧化酶的測(cè)量提供了一種快速而靈敏的方法。 它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行，并且很容易適應(yīng)自動(dòng)化而無需分離步驟。 該試劑盒使用我們的Amplite Red底物，可使用570 nm的吸光度酶標(biāo)儀進(jìn)行監(jiān)測(cè)。 使用Amplite 比色葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒，我們檢測(cè)到低至12.5 mU / mL的葡萄糖氧化酶。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 比色法葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測(cè)OD = 570nm處的吸光度

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1.1 Amplite 紅色儲(chǔ)備液（250X）：
將100μLDMSO（組分E）加入到Amplite Red（組分A）的小瓶中。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰*乙醇存在下，Amplite Red不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT或2-巰*乙醇的終濃度應(yīng)不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH 7-8下進(jìn)行。推薦提供的測(cè)定緩沖液（pH 7.4）。

1.2 HRP庫存解決方案（50X）：
將1mL測(cè)定緩沖液（組分B）加入到辣根過氧化物酶（組分C）的小瓶中。

1.3 葡萄糖氧化酶原液（100 U / mL）：
將1mL測(cè)定緩沖液（組分B）加入葡萄糖氧化酶（組分D）的小瓶中。

1.4 葡萄糖原液（10X）：
將5mL測(cè)定緩沖液（組分B）加入葡萄糖小瓶（組分F）中。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)
通過將2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶儲(chǔ)備溶液稀釋到200μL測(cè)定緩沖液（組分B）中來制備葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 然后進(jìn)行1：100連續(xù)稀釋，然后進(jìn)行1：2連續(xù)稀釋，得到連續(xù)稀釋的葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品，從10 mU / mL至0.156 mU / mL（GOS1 - GOS7）。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red儲(chǔ)備液（250X），100μLHRP儲(chǔ)備液（50X）和500μL葡萄糖儲(chǔ)備液（10X）加入4.3 mL分析緩沖液（組分B）中，制成5 mL工作溶液。