Amplite 熒光法葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒 是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的葡萄糖檢測(cè)的試劑盒，葡萄糖氧化酶是二聚體蛋白質(zhì)，其催化β-D-葡萄糖氧化成過(guò)氧化氫和D-葡糖酸-1,5-內(nèi)酯，其被水解成葡萄糖酸。它廣泛用于測(cè)定體液中的葡萄糖以及從飲料，食品和其他農(nóng)產(chǎn)品中去除殘留的葡萄糖和氧氣。此外，葡萄糖氧化酶通常用于生物傳感器中以檢測(cè)葡萄糖。 Amplite 葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒為溶液中葡萄糖氧化酶的測(cè)量提供了一種快速而靈敏的方法。它可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式進(jìn)行，并且無(wú)需分離步驟即可輕松適應(yīng)自動(dòng)化。該套件使用我們的Amplite Red基板，可實(shí)現(xiàn)雙重可錄制模式。熒光信號(hào)可以通過(guò)熒光酶標(biāo)儀或吸光度酶標(biāo)儀輕松讀取。使用Amplite 熒光葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒，我們?cè)?00μL反應(yīng)體積中檢測(cè)到低至0.05 mU / mL的葡萄糖氧化酶。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商，為您提供優(yōu)質(zhì)的Amplite 熒光法葡萄糖氧化酶檢測(cè)試劑盒 。

樣品實(shí)驗(yàn)方案

簡(jiǎn)要概述

1.準(zhǔn)備GO工作溶液（50μL）
2.添加葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品或測(cè)試樣品（50μL）
3.在37°C孵育10-30分鐘
4.監(jiān)測(cè)Ex / Em = 540 / 590nm處的熒光強(qiáng)度

溶液制備

1.儲(chǔ)備溶液

所有未使用的儲(chǔ)備溶液應(yīng)分成一次性等分試樣，并在制備后儲(chǔ)存在-20°C。避免反復(fù)凍融循環(huán)。
1. Amplite 紅色儲(chǔ)備液（250X）：
將100μLDMSO（組分E）加入到Amplite Red（組分A）的小瓶中。應(yīng)立即使用原液。注意：在硫醇如二硫蘇糖醇（DTT）和2-巰*乙醇存在下，Amplite Red不穩(wěn)定。反應(yīng)中DTT或2-巰*乙醇的終濃度應(yīng)不高于10μM。 Amplite Red在高pH（> 8.5）下也不穩(wěn)定。因此，反應(yīng)應(yīng)在pH 7-8下進(jìn)行。推薦提供的測(cè)定緩沖液（pH 7.4）。

2. HRP庫(kù)存解決方案（50X）：
將1mL測(cè)定緩沖液（組分B）加入到辣根過(guò)氧化物酶（組分C）的小瓶中。

3.葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（100 U / mL）：
將1mL測(cè)定緩沖液加入葡萄糖氧化酶小瓶（組分D）中。

4.葡萄糖原液（10X）：
將5mL測(cè)定緩沖液加入葡萄糖小瓶（組分F）中。

2.標(biāo)準(zhǔn)溶液

葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)
通過(guò)將2μL的100U / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋到200μL的測(cè)定緩沖液（組分B）中來(lái)制備葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品，以具有1000mU / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液。 然后取10μL1000mU/ mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行1：100稀釋，得到10mU / mL葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)溶液（GOS7）。然后進(jìn)行1：3連續(xù)稀釋以獲得剩余的連續(xù)稀釋的葡萄糖氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品（GOS6-GOS1）。包括非葡萄糖氧化酶緩沖液作為空白對(duì)照。 終的葡萄糖氧化酶濃度應(yīng)低兩倍（即0至5mU / mL）。注意：高濃度的葡萄糖氧化酶可能會(huì)因Amplite Red（非熒光產(chǎn)物）的過(guò)氧化而導(dǎo)致熒光信號(hào)降低。

3.工作溶液

將20μLDelterite Red儲(chǔ)備液（250X），100μLHRP儲(chǔ)備液（50X）和500μL葡萄糖儲(chǔ)備液（10X）加入4.3 mL分析緩沖液（組分B）中，使總體積為5 mL葡萄糖氧化酶（GO）工作溶液。 避光。