張經(jīng)理
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當(dāng)前位置:西安百螢生物科技有限公司>>分離試劑盒>> 60005ReadiPrep 線粒體/細(xì)胞質(zhì)分離試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號60005
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)代理商
所 在 地西安市
更新時間:2024-04-26 15:49:24瀏覽次數(shù):259次
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ReadiPrep 線粒體/細(xì)胞質(zhì)分離試劑盒
ReadiPrep 線粒體/細(xì)胞質(zhì)分離試劑盒提供了從哺乳動物細(xì)胞或組織中分離線粒體和細(xì)胞質(zhì)組分的便捷方法。 分離的線粒體是完整的,可以用線粒體標(biāo)記(例如MitoLite Green)進(jìn)行陽性染色。 分離的線粒體保留其生物學(xué)活性,并與許多下游應(yīng)用兼容,包括研究線粒體呼吸,線粒體膜電位,凋亡,mtDAN和mtRNA以及線粒體蛋白譜分析等。該試劑盒提供了兩種分離線粒體的選擇。 一種選擇是利用基于試劑的方法,該方法允許同時進(jìn)行多個樣品制備。 第二種選擇是利用Dounce均質(zhì)化。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的ReadiPrep 線粒體/細(xì)胞質(zhì)分離試劑盒。
樣品實驗方案
簡要概述
用PBS洗滌細(xì)胞
加入2 mL隔離緩沖液
在冰上孵育10分鐘
使用均質(zhì)器均質(zhì)化細(xì)胞或添加試劑A。
7000g離心10分鐘
去除上清液(細(xì)胞質(zhì)部分)
將沉淀重懸于隔離緩沖液中
7000g離心10分鐘
將沉淀重懸于測定緩沖液(線粒體級分)中
實驗步驟
1.用冷PBS洗滌細(xì)胞一次。 對于懸浮的細(xì)胞,請通過離心收集細(xì)胞。
2.向細(xì)胞中加入2 mL分離緩沖液(組分A),并在冰上孵育10分鐘。
3.可以通過兩種方式提取細(xì)胞質(zhì)。
①:將40 µL試劑A(組分B)加入混合物中,渦旋并在冰上孵育10分鐘。
②:使用Dounce組織研磨機(jī)勻漿4-5次,使細(xì)胞勻漿。
4.在4°C下以600 g離心10分鐘,收集上清液,在4°C下以7,000 g離心10分鐘。 上清是細(xì)胞質(zhì)部分。
5.將沉淀重懸于1 mL分離緩沖液(組分A)中,并在4°C下以7,000 g離心10分鐘。
6.丟棄上清液,并根據(jù)下游應(yīng)用將沉淀重懸在適當(dāng)?shù)臏y定緩沖液中。
7.蛋白質(zhì)濃度可以通過Amplite 熒光熒光胺蛋白質(zhì)定量試劑盒(Cat#11100)進(jìn)行定量。
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