冰凍切片脂質(zhì)油紅O染色試劑盒

產(chǎn)品說明書
主要用途
冰凍切片脂質(zhì)油紅O染色試劑是一種旨在使用高度脂溶性偶氮染料油性紅O染色技術(shù)，特異性地使組織細胞內(nèi)中性甘油三脂、脂質(zhì)以及脂蛋白顯示紅色，以分析冰凍切片組織樣品中脂質(zhì)狀況的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種人體和動物組織冰凍切片樣本。用于成脂細胞定性、細胞病理學(xué)分析（脂質(zhì)細胞瘤；LIPOID）和識別（脂肪肉瘤；liposarcoma）等研究。產(chǎn)品即到即用，操作簡捷，性能穩(wěn)定，著色清晰。
技術(shù)背景
脂類物質(zhì)（LIPIDS）是一類脂溶性（疏水性）的自然分子，包括脂肪酸（FATTY ACID）及其衍生物甘油一脂、二脂、三脂和磷脂，以及其它固醇類（STEROL）物質(zhì)，例如膽固醇。脂類物質(zhì)在機體中具有能量儲存的作用，是膜結(jié)構(gòu)的組成成分和細胞信號分子。油性紅O（Oil Red O），又稱為27號紅色溶劑（Solvent Red 27）或蘇丹紅5B（Sudan Red 5B），是一種脂溶性偶氮染料（LYSOCHROME AZO DYE）。其分子式為C26H24N4O，分子量為408.51。染色顯示組織細胞脂類物質(zhì)呈紅色。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液（Reagent A） 毫升
固著液（Reagent B） 毫升
脫水液（Reagent C） 毫升
染色液（Reagent D） 毫升
澄清液（Reagent E） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里；染色液（Reagent D），避免光照；有效保證6月
用戶自備
小型染色缸：用于細胞染色操作
溫箱：用于試劑預(yù)熱或保存
光學(xué)顯微鏡：用于組織細胞染色后觀察分析
1
蘇木素復(fù)染試劑盒 用于常規(guī)染色后復(fù)染
經(jīng)典水相封片液 用于染色后封片處理
120
10
20
10
10
實驗步驟
實驗開始前，將染色液（Reagent D）置于60℃溫箱里預(yù)熱，避免光照。然后進行下列操作。
一、 樣本固著處理
1． 取出待測的10微米厚冰凍組織切片（注意：使用快速冷凍snap－frozen制片，避免包埋處理）
2． 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個樣品表面
3． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
4． 小心加上200微升固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面
5． 室溫下，孵育10分鐘
6． 小心移去切片上的固著液（Reagent B）
7． 小心加上200微升清理液（Reagent A），清洗樣品表面
8． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
9． 重復(fù)實驗步驟7至8一次
二、樣本染色處理
1． 小心加上200微升脫水液（Reagent C）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
2． 室溫下靜置5分鐘
3． 小心移去切片上的脫水液（Reagent C）
4． 重復(fù)實驗步驟1至3一次
5． 小心加上200微升染色液（Reagent D），鋪滿整個切片樣品表面
6． 室溫下靜置7分鐘；或直至可見紅色
7． 小心移去切片上的染色液（Reagent D）
8． 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
9． 輕輕移去切片上的清理液（Reagent A）
三、 樣本復(fù)染處理
1． 小心加上200微升澄清液（Reagent E）在切片上，鋪滿整個切片樣品表面
2． 室溫下孵育3分鐘
3． 小心移去切片上的澄清液（Reagent E）
4． 室溫下，小心將切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
5． 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
6． （選擇步驟）樣本復(fù)染處理（蘇木素）
7． 放上蓋玻片或水相封片（注意：建議使用 ）
8． 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察：脂類物質(zhì)呈現(xiàn)紅色（如果復(fù)染則細胞核呈現(xiàn)籃色）
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經(jīng)典水相封片液
注意事項
1． 本產(chǎn)品為50次操作
2． 操作時，須戴手套
3． 所有操作在室溫下進行
4． 每次更換試劑溶液時，保持切片表面基本晾干。空氣中晾干狀態(tài)為沒有水滴，呈濕潤狀態(tài)，可見反光
5． 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿切片表面
6． 樣品染色避免過度，肉眼可見紅色即可終止染色
7． 建議使用
8． 組織染色完成后，即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察
9． 樣品染色后保存，避免光照
10．封片處理，避免使用有機溶劑類包括乙醇等，而使用水相封片液；建議使用經(jīng)典水相封片
11．本公司提供系列脂類染色試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準
1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰
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蘇木素復(fù) 增加染色對比度 染試劑盒
液